Противоопухолевые эффекты новых производных метилпиразолотриазина и пиразолобензотриазина при тестировании на культурах клеток рака молочной железы MCF-7, MDA-MB231 и BT-474

Аннотация

Введение. Рак молочной железы (РМЖ) занимает лидирующие позиции среди онкологических заболеваний по частоте заболеваемости и смертности у женщин во всем мире. Из-за высокой гетерогенности опухолевых клеток и морфофункциональных вариаций подбор эффективных схем лечения часто вызывает затруднения. Ключевыми проблемами при терапии РМЖ является развитие устойчивости к применяемым препаратам, что делает необходимым поиск новых лекарственных средств.

Цель. Оценить потенциал двух новых производных метилпиразолотриазина (МПТА 1, МПТА 2) и двух производных пиразолобензотриазина (ПБТА 1, ПБТА 2) на предмет возможности их применения в качестве противоопухолевых средств, в том числе для химиотерапии РМЖ.

Материалы и методы. Основной методикой явилось изучение цитотоксической (ЦТА) и цитостатической активности (ЦСА) этих производных в концентрациях от 0,25 до 10,0 мкмоль/л в культурах клеток РМЖ MCF-7, MDA-MB-231 и BT-474, а также нетрансформированных клеток эпителия молочной железы человека MCF-10a. ЦТА определяли методом метилтетразолиевого теста (MTT). Для оценки эффекта рассчитывали IC₅₀T — концентрацию, вызывающую 50 %-ную гибель клеток. ЦСА изучали при более длительной культивации (72 ч), рассчитывая IC₅₀S как концентрацию, тормозящую прирост клеток на 50 %. Статистический анализ проводился с использованием непараметрических тестов (Краскела —  Уоллиса и Манна — Уитни) при уровне значимости p < 0,05.

Результаты. Наиболее высокая ЦТА в отношении клеток линии MCF-7 выявлена для производного МПТА 1 (IC₅₀ 8,15 мкмоль/л), клеток линии MDA-MB-231 — для производного ПБТА3 (IC₅₀ 3,79 мкмоль/л), клеток линии BT474 — для производных МПТА 1 (IC₅₀ 4,48 мкмоль/л) и МПТА 2 (IC₅₀ 6,15 мкмоль/л). Все тестируемые соединения проявили сходную ЦСА в отношении клеток линии MCF-7 в среднем в 1,20–1,45 раза выше активности препарата сравнения Темозоломида (минимальная жизнеспособность клеток — 55 %). В культурах MDA-MB-231 и BT-474 МПТА 1 и МПТА 2 проявляли более высокую ЦСА по сравнению с эффектами ПБТА 1, ПБТА 2 и темозоломида в 1,16–1,50 раза. Все исследованные производные метилпиразолотриазина и пиразолобензотриазина и препарат сравнения Темозоломид продемонстрировали низкую ЦСА в отношении неопухолевых эпителиальных клеток линии MCF-10a; их IC₅₀S лежала за пределами диапазона измерения 10,0 мкмоль/л. Новые производные метилпиразолотриазина и пиразолобензотриазина по возрастанию совокупности ЦТА и ЦСА расположены в порядке: МПТА 2, ПБТА 1 < темозоломид < ПБТА 2 < МПТА 1.

Выводы. Таким образом, МПТА 1 (3-(3'-Фенил-4'-метоксикарбонил-изоксазолил)-7-метилпиразоло[5,1-c][1,2,4]триазин) является лидером по ЦТА и ЦСА среди протестированных новых соединений и рекомендуется для дальнейших доклинических испытаний.